Возможности определения ex vivo активности процесса образования нейтрофильных внеклеточных ловушек и уровня цитруллинированного гистона H3 крови при оценке и стратификации рисков у детей с остаточными посттуберкулёзными изменениями в лёгких

Введение. После лечения туберкулеза у детей, в ряде случаев, формируются остаточные изменения в лёгких, определяющие риски развития осложнений или рецидивов заболевания. С этим связана целесообразность применения патогенетически обоснованных и неинвазивных лабораторно-диагностических критериев для оценки и стратификации данных рисков.

Цель – у детей с посттуберкулезными изменениями в легких оценить ex vivo способность изолированной из цельной крови фракции нейтрофильных лейкоцитов к формированию внеклеточных ловушек (НВЛ) при неспецифической антигенной стимуляции во взаимосвязи с in vivo уровнем цитруллинированного гистона H3 (citH3) крови.

Методы. Были исследованы группы: контроля («Контроль») – здоровые дети возрастом от 4 до 7 лет, n=26 и дети с остаточными посттуберкулезными изменениями («Пост-ТБ»), от 4 до 14 лет, n=18. Критерии исключения: наличие сопутствующих хронических соматических, инфекционных и аутоиммунных заболеваний. На изолированную из крови фракцию нейтрофилов воздействовали полибактериальным стимулятором. Появление НВЛ оценивали с помощью люминесцентной микроскопии. Уровень citH3 определяли методом иммуноферментного анализа. Распределение значений показателей носило отличный от нормального характер (критерий Шапиро-Уилка). Различия между группами считали значимыми при p<0,05 и оценивали с использованием критериев Манна-Уитни, Краскела-Уоллиса и post-hoc анализа. По показателю «Суммарная доля НВЛ» группа Пост-ТБ была разделена на подгруппы с низкой и высокой способностью к формированию НВЛ («Пост-ТБ-Н» и «Пост-ТБ-В», соответственно).

Результаты. В группе Пост-ТБ доля нитевидных НВЛ и суммарная доля НВЛ были выше, чем в группе Контроль (p=0,0016 и p=0,0035, соответственно). Концентрация цитруллинированного гистона H3 в крови в группе Пост-ТБ превышала значения в группе Контроль (p=0,0101). При этом различий по содержанию облаковидных НВЛ между группами выявлено не было (p=0,8047). В подгруппе Пост-ТБ-В процент нитевидных НВЛ и суммарная доля НВЛ превышали значения в группе Контроль, (p_post-hoc = 0,00002 и p_post-hoc < 0,0001, соответственно). В подгруппе Пост-ТБ-Н доля нитевидных НВЛ была ниже значений подгруппы Пост-ТБ-В (p_post-hoc = 0,0021). Подгруппы Пост-ТБ-Н и Пост-ТБ-В характеризовались различной концентрацией цитруллинированного гистона H3 в сыворотке крови, уровень которого в подгруппе Пост-ТБ-В превышал значения группы Контроль (p_post-hoc = 0,0105) и Пост-ТБ-Н (p_post-hoc = 0,0292). Коэффициент ранговой корреляции Спирмена между долей нитевидных НВЛ и концентрацией citH3 в крови составил r=0,711 (p=0,0006).

Заключение. Способность нейтрофилов к формированию НВЛ у детей с посттуберкулезными изменениями в легких имеет особенности, а ее исследование может стать полезным для персонифицированной оценки риска возникновения рецидива заболевания.